CYAO Project CYAO: Cyanobacterial Platform Optimised for Bioproduction
Ricetta F/2
Tracce Metalli 0.4 mL
Stock Fosfato 0.4 mL
Mix Vitamine 0.2 mL
NaHCO3 Stock (fresco) 1.0 mL
Per 400 mL Acqua Marina Artificiale
Portare il pH tra 7.8-8.2
Stocks
Soluzione Stock Fosfato:
NaH2PO4 H2O 1 g
Per 200 mL H20 distiallata
Soluzione Stock Tracce Metalli:
FeCl3 0.13 g
EDTA 0.87 g
CuSO4 5H2O 0.98 g/100 mL 100 microL
ZnSO4 7H2O 2,2 g /100 mL 100 microL
CoCl2 6H2O 1 g/100 mL 100 microL
MnCl2 4H2 18 g/100 mL 100 microL
Na2MoO4 2H2O 0.63 g/100 mL 100 microL
Per 200 mL H20 distillata
Stock Vitamine:
Biotina 250 microL
Vitamina B12 250 microL
Thiamina HCl 50.0 mg
Portare a 250 mL in H20 bi-distillata
Suddividre in aliquote da 200 (o 400) microL in tubi da 1.5 mL; Congelare e mantenere a -20 C
Soluzione NaHCO3 (preparare fresca):
NaHCO3 0.42 g
In 10 mL di H20 distillata
- poi sterilizzare per filatrazione prima di aggiungere alle soluzione di F/2
Piastre Agar:
- Preparare un soluzione con 2X di tutti gli stock F/2 per stessa quantita di Acqua marina artificiale, ma senza vitamin (tipicamente 200 mL) + (opzionale, aggiungere 20 mM HEPES finale (da una soluzione sterilizzara per filtrazione))
- Preparare una soluzione 3% w/v di Agar Nobile in acqua bidistillata e autoclavarla (typicamente 200 mL in una bottoglia da 500 mL)
- Lasciar raffreddare la soluzuione di agar autoclavato fino a circa 40 C (in un bagno a immersione),
- Miscriare quindi la soluzione di agar alla soluzione 2X di F/2 solution, mischiare, aggiungere le vitamine e colare le piastre

Scarica la ricetta del mezzo F/2 + Acqua marina artificiale in formato PDF: F2.pdf
La ricerca finanziata dalla Fondazione Cariplo nell'ambito del programma sulle Biotecnologie e sulla Bioeconomia Fondazione Cariplo
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